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細(xì)胞污染預(yù)防的種類和方法

細(xì)胞污染在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，非常常見。目前為止，防止細(xì)胞污染的首要手段是預(yù)防。細(xì)胞污染通常會出現(xiàn)在生物安全柜和培養(yǎng)箱這兩個地方，因此，如何做好這兩個地方的預(yù)防措施呢？一、所有進(jìn)入安全柜的東西都要盡可能保證無菌直接購買商用試劑和耗材是穩(wěn)定的方式，如Gibco、中科百抗的血清，Corning的耗材等，這些品牌的試劑和耗材一般只要是正品都可以保證無菌。若自己配制的試劑，那么在配制中需要嚴(yán)格按無菌操作進(jìn)行。二、分裝的試劑建議過濾一次試劑在分裝時可以考慮再用針頭式過濾器過濾一次，減少污染...

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細(xì)胞培養(yǎng)常用抗生素

抗生素在細(xì)胞培養(yǎng)中的使用可以最大限度地降低污染，從而降低細(xì)胞、試劑的費(fèi)用損失和時間損失。因此，細(xì)胞培養(yǎng)常用抗生素有哪些呢？一、嘌呤霉素鹽酸鹽Puromycin,Dihydrochloride嘌呤霉素(Puromycin)是一種氨基糖苷類抗生素，能有效抑制革蘭氏陽性菌生長，還能抑制原生生物、藻類、哺乳動物和昆蟲細(xì)胞的生長，一般2天內(nèi)能殺死99%的細(xì)胞。二、鹽酸萬古霉素VancomycinHydrochloride鹽酸萬古霉素(Vancomycinhydrochloride)是一...

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分子實(shí)驗(yàn)中DNA連接酶的作用機(jī)制

DNA連接酶(DNAligases)是一類重要的酶，在DNA復(fù)制、修復(fù)和重組過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。一、ATP依賴性連接在真核生物的連接酶如DNA連接酶I中，連接反應(yīng)是ATP依賴性的。ATP的水解驅(qū)動了DNA鏈的連接。連接反應(yīng)主要發(fā)生在DNA雙鏈斷裂的末端。T4DNA連接酶是典型的ATP依賴性連接：（1）原理與特點(diǎn)：T4DNA連接酶是一種來自噬菌體T4的連接酶，其主要原理是在DNA鏈斷裂的末端引入磷酸二酯鍵，將兩個DNA片段連接起來。它需要ATP作為輔助能量。（2）優(yōu)點(diǎn)：T4DN...

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分子實(shí)驗(yàn)中DNA連接酶的作用原理

DNA連接酶(DNAligases)是一類重要的酶，在DNA復(fù)制、修復(fù)和重組過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。它們的主要功能是連接DNA鏈上的磷酸二酯鍵，形成完整的DNA雙鏈。這一過程對于維持基因組的完整性和穩(wěn)定性至關(guān)重要。DNA連接酶的基本作用原理是通過催化DNA鏈的連接，以形成連續(xù)的磷酸二酯骨架。連接過程通常包括以下三個步驟：（1）底物識別DNA連接酶識別DNA分子中需要連接的兩個斷裂部位(通常是5'末端和3'末端)。（2）磷酸基團(tuán)的激活在連接前，DNA連接酶通常需要結(jié)合ATP(腺苷三...

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抗體抗原測定的Elisa方法

在醫(yī)學(xué)臨床、生物學(xué)研究上，用于測定各種各樣的抗原、半抗原和抗體，Elisa法為雜交瘤細(xì)胞株的篩選提供了簡便、靈敏、快速的測定方法。那讓我們一起來看看抗體抗原測定的Elisa方法吧！抗體抗原測定的Elisa方法一：直接法1、將抗原吸附在固相載體表面；2、添加一種封閉試劑，防止檢測抗體出現(xiàn)非特異性結(jié)合；3、添加直接偶聯(lián)某種酶（如HRP）的檢測抗體。該檢測抗體將結(jié)合抗原，并且剩余的抗體會從孔中洗掉；4、添加這種酶的底物；5、短暫孵育后，在酶標(biāo)儀上測定每個孔的信號?？贵w抗原測定的El...

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