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Alzet滲透泵的基本操作指南

 更新時間:2024-11-19 點擊量:465
  Alzet滲透泵的基本操作指南
  一、Alzet滲透泵型號選擇
  Alzet滲透泵提供了100ul、200ul和2ml三種不同的藥物容量規(guī)格,持續(xù)時間從3天到6周不等。實驗時應(yīng)根據(jù)具體需求選擇合適的型號。其中,100ul和200ul的適合成年小鼠使用,而2ml的由于容積較大,更適合大鼠或其他體型較大的動物。
  二、Alzet滲透泵濃度計算
  藥物濃度的調(diào)配需根據(jù)每日用藥量和緩釋泵的輸送速率兩項參數(shù)來計算,每日用藥量可通過查閱專業(yè)文獻(xiàn)獲取。此外,每支緩釋泵的輸送速率信息會附在包裝盒上,應(yīng)根據(jù)包裝上的速率進(jìn)行配藥。
  濃度計算舉例:
  Eg:2001滲透泵,給藥:抗利尿激素(ADH),
  1.查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),大鼠正常的ADH分泌量為30ng/天/只,或1.25ng/小時/只。然后,計算出完成1.25ng/小時所需輸注量所需的ADH濃度:
  ko=Q•Cd
  其中ko(µg/hr)是質(zhì)量輸送速率,Cd(µg/µl)表示藥物溶液濃度,Q(µl/hr)表示泵的泵送速率。
  2.2001型泵的(標(biāo)稱)泵送速率為1µl/hr(Q),因此所需濃度(Cd)為:
  Cd=1.25 ng/hr/1µl/hr=1.25 ng/µl
  =1.25 x 10-3µg/µl
  3.2001型泵儲液體積(標(biāo)稱)為200µl。為了達(dá)到所需的1.25 x 10-3µg/µl濃度,應(yīng)在200µl中溶解的ADH量為:
  m=c•v
  (1.25 x 10-3µg/µl)x 200µl=0.25µg
  綜上,為了模擬大鼠正常的ADH分泌量30 ng/天/只(或1.25 ng/小時/只),必須在溶液中配制濃度為1.25 x 10-3µg/µl的ADH溶液。應(yīng)配制過量溶液,以保證泵填充期間的安全裕度。
  注意事項:
  1、不能根據(jù)Alzet滲透泵自身體積來計算配藥濃度,Alzet滲透泵實際載藥體積會稍大于宣稱體積;
  2、泵體埋入動物體內(nèi)后應(yīng)在釋放周期結(jié)束時取出,不能一直留在動物體內(nèi)。
  三、Alzet滲透泵藥液灌充
  1、將Alzet滲透泵垂直握在手中,從頂部的孔處插入充液針,直至針尖輕輕接觸到緩慢釋放泵底部,然后略微向上提起充液針約1mm。
  2、輕柔地推動注射器,將藥液注入緩慢釋放泵(緩慢釋放泵應(yīng)始終保持垂直)。當(dāng)在緩慢釋放泵的孔處看到藥液溢出時,請停止注射,輕輕拔出充液針。
  3、將流量調(diào)節(jié)器完q插入泵體,完成注射,隨后進(jìn)行培育或植入手術(shù)。
  4、若泵體內(nèi)出現(xiàn)氣泡,可將流量調(diào)節(jié)器拔出并重新進(jìn)行注射。
  注意事項:
  1、泵內(nèi)藥物液體需充盈,泵內(nèi)不應(yīng)有空氣存在,否則可能導(dǎo)致泵送速度不穩(wěn)定。
  2、灌輸速度宜適中,以免產(chǎn)生氣泡,避免采用容積過大的注射器進(jìn)行填充。
  四、Alzet滲透泵泵體孵育
  在Alzet滲透泵啟動階段,可能會出現(xiàn)泵送速率不穩(wěn)定的情況。為了調(diào)節(jié)泵送速率,建議在植入前進(jìn)行預(yù)處理。
  1、準(zhǔn)備50ml離心管,倒入適量的0.9%生理鹽水。
  2、將已灌裝藥液的Alzet滲透泵放入離心管中,然后將離心管放入37℃恒溫箱中進(jìn)行一定時間的培養(yǎng)(具體時間根據(jù)不同型號的Alzet滲透泵而異)。
  注意:在培養(yǎng)過程中,確保生理鹽水完q覆蓋泵體。
  五、Alzet滲透泵植入手術(shù)
  Alzet滲透泵可在背部皮下或腹腔植入進(jìn)行全身性給藥;此外也可連接導(dǎo)管將藥物引導(dǎo)到特定部位進(jìn)行給藥。
  六、Alzet滲透泵皮下植入
  1、使動物陷入麻醉狀態(tài),令其躺臥。
  2、在肩胛骨之間的皮層上開啟一個裂口。
  3、利用止血夾分離皮下結(jié)締組織,形成一處間隙。
  4、將漸進(jìn)泵植入其中,確保流量調(diào)節(jié)器不朝向切口。
  5、利用傷口鉗或縫合線縫合皮層切口。
  七、Alzet滲透泵腹腔植入
  1、麻醉動物,使動物處于仰臥姿態(tài)。
  2、在動物的胸廓下腹中線的皮膚上用刀劃開口。
  3、鑷子挑起腹肌,避免傷及內(nèi)臟,然后用剪刀向下剪開腹肌。
  4、將緩釋泵植入切口,流量調(diào)節(jié)器不能朝向切口。
  5、用縫線縫合肌肉切口,皮膚切口可以使用傷口夾或縫線縫合。
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