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你知道熒光定量PCR的應用嗎？

熒光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR擴增反應體系中加入熒光基團，通過對擴增反應中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。那么你知道熒光定量PCR的應用嗎？讓我們一起來看看吧！一、分子生物學研究1.核酸定量分析：對傳染性疾病進行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測,比如近期流行的甲型H1N1流感，轉基因動植物基因拷貝數(shù)的檢測，RNAi基因失活率的檢測等。2.基因表達差異分析：比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達差...

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你知道細胞凍存的原理和實驗步驟嗎？

細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常用技術。那么你知道細胞凍存的原理和實驗步驟嗎？讓我們一起來看看吧！原理：將細胞放在-196℃液氮中，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)，減少細胞代謝，理論上儲存時間幾乎是無限的。最佳的冷凍條件是盡可能地降低細胞內(nèi)的晶體形成，減少細胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質對細胞造成的低溫損傷。上述要求可通過下列方法獲得：1.緩慢冷凍，使細胞內(nèi)水分離開細胞，但不可太慢，以避免冰晶形成；2.用親水的低溫保護劑排除水分；3.在盡可能低的溫度下保存細胞，降低高濃度鹽對冰中蛋白質變性的...

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細胞凍存有何注意事項？

細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常用技術。原理是將細胞放在-196℃液氮中，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)，減少細胞代謝，理論上儲存時間幾乎是無限的。那么細胞凍存有何注意事項呢？讓我們一起來看看吧！一、DMS0稀釋時會釋放大量熱量，不能直接加到細胞液中，須事先配制，且DMSO必須是細胞培養(yǎng)級別的；二、緩慢冷凍，細胞逐步脫水，不會因產(chǎn)生大的冰晶而受到損害；三、選擇細胞生長良好、密度約為80-90%、活力達90%以上的細胞凍存；四、凍存時細胞密度少于5X105個活細胞/mL時，很難成功復蘇；五、...

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如何區(qū)分各種PCR技術？

PCR是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，PCR技術有很多，那么我們應該如何區(qū)分各種PCR技術呢？讓我們一起來看看吧！一、普通PCRPCR是普通PCR，以雙鏈DNA為模板，以dNTP為底物，特異性地擴增雙鏈DNA。然后采用瓊脂糖凝膠電泳對產(chǎn)物進行檢測，只能做定性分析。二、實時熒光定量PCRqPCR和Real-timePCR是實時熒光定量PCR，以cDNA為模板，以dNTP為底物，對擴增出的DNA進行定量分析。實時熒光定量PCR常用的方法：水解探針法和熒光染料法...

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細胞實驗的常見問題有哪些？如何解決呢？

細胞培養(yǎng)做為生物學研究最基礎的技術之一，可以說是滲透科研界的方方面面。那么細胞實驗中的常見問題有哪些？應該如何解決呢？讓我們一起來看看吧！一、如何選用細胞系培養(yǎng)基？優(yōu)先根據(jù)細胞來源公司提供的培養(yǎng)條件，。一般建議不要隨意更換培養(yǎng)基種類。細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養(yǎng)基，若驟然使用與原先提供的培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基，可能造成細胞形態(tài)發(fā)生變化或無法存活，以及細胞的表型功能丟失。二、細胞發(fā)生微生物污染時，應如何處理？直接丟棄或更換，將未受污染的細胞轉移至其它培養(yǎng)箱，并用消毒劑消...

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