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原代細(xì)胞取材的注意事項(xiàng)有哪些？

取材作為原代細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中至關(guān)重要的一步，那么原代細(xì)胞取材的注意事項(xiàng)有哪些呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、皮膚和粘膜主要取皮片，面積一般2~4平方厘米。二、內(nèi)臟和實(shí)體瘤1.無(wú)菌環(huán)境；2.熟悉所需組織的類型和部位；3.要避開(kāi)破潰、壞死液化部分，以防污染，盡量去除混雜的結(jié)締組織。三、血液細(xì)胞一般多抽取靜脈外周血，或從淋巴組織中(如脾、扁桃體、胸腺、淋巴結(jié)等)分離細(xì)胞，取材時(shí)應(yīng)注意抗凝。四、骨髓、羊水、胸/腹水細(xì)胞嚴(yán)格無(wú)菌，注意抗凝，還要盡快分離培養(yǎng)，離心后，用無(wú)鈣、鎂PBS洗兩次，再...

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WB實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題有哪些？如何解決？

WesternBlot雖是實(shí)驗(yàn)室zui常用的蛋白分析技術(shù)，但是由于它步驟繁瑣、操作流程長(zhǎng)、影響因素多，所以導(dǎo)致在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中會(huì)遇到各式各樣的問(wèn)題，那么你知道WB實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題有哪些呢？該如何解決呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、目標(biāo)條帶沒(méi)有信號(hào)原因分析：1.樣品中可能含有蛋白酶，使蛋白樣品分解成小分子。2.目標(biāo)蛋白濃度過(guò)低（低于檢測(cè)下線）。3.轉(zhuǎn)膜時(shí)間太短導(dǎo)致目標(biāo)蛋白沒(méi)有充分轉(zhuǎn)移到膜上，或者轉(zhuǎn)膜時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致樣品轉(zhuǎn)穿。4.一抗的特異性不佳，導(dǎo)致一抗無(wú)法識(shí)別目標(biāo)蛋白。解決方法：1.添加蛋白...

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你知道RNA提取的實(shí)驗(yàn)步驟是什么嗎？

RNA是目前發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)生物功能zui豐富多樣的生物大分子，同時(shí)是DNA與蛋白質(zhì)信息傳遞的橋梁，因此完整RNA的提取和純化是功能基因組時(shí)代的重要手段，那么你知道RNA提取的實(shí)驗(yàn)步驟是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！以Trizol法提取組織細(xì)胞為例：1.提取細(xì)胞RNA時(shí)，先離心沉淀細(xì)胞，每5~106個(gè)細(xì)胞加1mlTrizol后，反復(fù)用槍吹打或劇烈震蕩以裂解細(xì)胞；2.將上述組織或細(xì)胞的Trizol裂解液轉(zhuǎn)入EP管中，在室溫15~30℃下放置5分鐘；3.在上述EP管中，按照每1mlTri...

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RNA提取成功的要點(diǎn)有哪些？

RNA是目前發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)生物功能zui豐富多樣的生物大分子，同時(shí)是DNA與蛋白質(zhì)信息傳遞的橋梁，因此完整RNA的提取和純化是功能基因組時(shí)代的重要手段。那么你知道RNA提取成功的要點(diǎn)有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！1.組織樣本要盡可能的新鮮，避免反復(fù)凍融。2.提取時(shí)組織要充分研磨，組織量不宜過(guò)少，更不宜過(guò)多。3.加入裂解液后應(yīng)給予充分的孵育時(shí)間，使樣本充分裂解。4.在用Trizol法提取時(shí)，分層后吸取上清的原則是“寧愿少吸，不能多吸”，千萬(wàn)不能提取到中間層，否則會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的基因組D...

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Alzet滲透泵2002使用注意事項(xiàng)

Alzet滲透泵2002是一種小型、可植入式的膠囊滲透泵，可應(yīng)用于小鼠、大鼠及其他實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究。該泵無(wú)需進(jìn)行外部連接或頻繁處理，就能以恒定的速率持續(xù)給藥1天到14天的時(shí)間。Alzet滲透泵2002泵送率為0.5μl/hr(±0.1μl/hr)，持續(xù)時(shí)間為14天，泵容量為200μl。Alzet滲透泵2002由3個(gè)組件組成，分別是：灌注管(fillingtube)、流量調(diào)節(jié)器(flowmoderator)、泵(pumpbodymaterials)。為了更好的使用Al...

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