邁迪安可凍干糞便直擴(kuò)qPCR/RT-qPCR預(yù)混液中含有優(yōu)化的添加劑，對(duì)糞便樣本中存在的抑制物有更強(qiáng)的耐受性，同時(shí)可保持病人樣本的質(zhì)量和完整性。該試劑可以兼容各種凍干條件，通過通過干燥開發(fā)常溫穩(wěn)定的檢測(cè)。其即用型的優(yōu)化配方，可以減少額外的優(yōu)化步驟，只需要加入特異性引物探針即可。

Lyo-Ready™ 可凍干糞便直擴(kuò)qPCR /RT-qPCR 預(yù)混液是不含甘油、4x濃度、含有凍干賦形劑的優(yōu)化配方，適用于從糞便樣本中直接進(jìn)行靈敏地DNA 或RNA檢測(cè)。能夠簡化糞便DNA/RNA檢測(cè)的研發(fā)，縮短樣本處理檢測(cè)周轉(zhuǎn)時(shí)間，簡化糞便DNA/RNA檢測(cè)的研發(fā)，可兼容凍干，常溫下保質(zhì)期更長，減少冷鏈儲(chǔ)運(yùn)成本。

適用于液體或者凍干體系——擴(kuò)增效率不受任何影響

A) 使用可凍干糞便直擴(kuò)qPCR預(yù)混液(MDX142)對(duì)20%人工糞便樣本中10倍連續(xù)稀釋的DNA樣本(分別為10,000,1,000, 100 和10個(gè)拷貝) 直接擴(kuò)增

B) 使用可凍干糞便直擴(kuò)RT-qPCR預(yù)混液(MDX143)對(duì)5%人工糞便樣本中10倍連續(xù)稀釋的RNA樣本(分別為10,000,1,000, 100 和10個(gè)拷貝) 直接擴(kuò)增對(duì)比液體體系(藍(lán)色)和凍干干燥后的體系(紅色)，結(jié)果顯示凍干體系具有和液體體系相同的靈敏度和可重復(fù)性

在標(biāo)準(zhǔn)和快速反應(yīng)循環(huán)設(shè)置下的高效性能——檢測(cè)更靈活、周轉(zhuǎn)時(shí)間更短

使用可凍干糞便直擴(kuò)qPCR預(yù)混液(MDX142)對(duì)6.6 mg/mL人體糞便中的兩個(gè)哺乳動(dòng)物DNA靶標(biāo)(紅色)進(jìn)行擴(kuò)增。反應(yīng)在QuantstudioTM 7 Flex Real-Time PCR儀上，分別使用標(biāo)準(zhǔn)循環(huán)和快速循環(huán)兩種設(shè)置進(jìn)行。結(jié)果顯示，在標(biāo)準(zhǔn)和快速循環(huán)的擴(kuò)增條件下，可凍干糞便直擴(kuò)qPCR預(yù)混液都有相同的擴(kuò)增效率和熒光強(qiáng)度，檢測(cè)的靈敏度和可重現(xiàn)性均保持一致。

標(biāo)準(zhǔn)循環(huán):95°C 3分鐘，95°C 10秒，60°C 30秒，40個(gè)循環(huán);

快速循環(huán):95°C 3分鐘，95°C 1秒， 60 °C 1秒，40個(gè)循環(huán)。

凍后常溫穩(wěn)定性長達(dá)12個(gè)月以上

將可凍干糞便直擴(kuò)qPCR/RT-qPCR預(yù)混液干燥后進(jìn)行加速熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。試劑干燥后(紅色)在 37 C 保存4周，與新鮮液體試劑(藍(lán)色)進(jìn)行對(duì)比: (A) 20%糞便樣本的 qPCR檢測(cè) (B) 5%糞便樣本的RT-qPCR檢測(cè)。結(jié)果顯示，凍干后試劑與液體試劑具有一致的活性 (<0.5 ΔCt)。凍干后試劑在常溫下可保持穩(wěn)定性至少12個(gè)月以上。

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